Tanda488 标记试剂盒

Tanda® 488 SE Labeling Kit

产品货号：TDLK23006S,TDLK23006M,TDLK23006L

产品规格：S, M, L

目录价：询价

产品内容：

储存条件

各组分按标签温度保存，有效期见外包装。

产品介绍

Tanda^® 标记试剂盒包含您需要的利用本公司染料或生物素（Biotin）迅速标记抗体的所有组分。标记过程只需将抗体和染料简单混合于试剂盒提供的反应缓冲溶液中，进行短时间的孵育即可。标记 后约 4-6 分子染料与 1 分子抗体共价结合。Tanda^® 标记试剂盒是共价标记，所以用它标记的抗体可以用于多色荧光染色， 而不会发生抗体间的染料转移现象。

Tanda^® 标记试剂盒可以兼容 NaN3、低浓度的甘油、Tris 和甘氨酸。试剂盒里提供的微型超滤离心管可以在标记前快 速去除不兼容的小分子抗体稳定剂。

Tanda^® 标记试剂盒适合标记 IgG等蛋白。如果标记其他非IgG蛋白质，可能标记的 DOL（degree of labeling）要根据不同蛋白来计算所需染料量。Tanda^® 标记试剂盒可能导致 IgM抗体变性。

商品化标记二抗仍可以识别出使用 Tanda^® 试剂盒标记的一抗，因此如果多个来自同一物种的抗体用于多色免疫 荧光染色法，二抗无法区分同一物种来源的未标记的一抗和 使用 Tanda^® 试剂盒标记的一抗。Tanda^® 标记试剂盒标记的抗体也可以用作传统间接免疫荧光法检测后的三级染色。

Tanda®优化标记步骤

重要：在您开始之前，对照表 1（Tanda® 抗体 兼容性和标记步骤选择指南）确定您的抗体组成和浓度是否 适用 Tanda® 标记试剂盒以及哪种标记步骤适合您。 如果有必要，联系抗体厂家了解您的抗体/ IgG稳定剂的浓度。

1. 抗体浓度 1-5 mg/mL 是较合适的标记浓度。如果抗体是冻干粉形式或浓度更浓，用PBS溶解或稀释抗体。将需要标记的抗体转移到干净的EP管内。确保 IgG 的μg 数匹配试剂盒的标记范围。

2. 将组分B用1mL蒸馏水充分溶解，使成为10 × 反应缓冲液。

3. 以 1:10 混合 10 × 反应缓冲溶液与抗体，使抗体溶液最终形成 1×反应缓冲液（例如 9 μL 的抗体加 1 μL 10×反应缓冲液）。用移液器上下吹吸混合。

4. 将步骤3的溶液全部转移至 Tanda® 染料瓶中，这里不需要检测瓶中染料的含量，涡旋几秒钟溶解染料。

5. 室温避光孵育 30 min，最好每10min涡旋混匀1次。

6. 反应过程中清洗超滤管。将标记完成的蛋白溶液转入处理好的超滤管内，8000g离心约10分钟，丢弃滤出液，再向滤芯内加入1XPBS，反复离心至少四次后便可得到纯的染料-抗体共轭物。

7. 向超滤后的共轭物加入符合自己需求的缓冲液进行后续实验。

8. 染料-蛋白共轭物浓度的确定可通过以下公式计算：
  C(mg/mL) = {[A280 -(Amax× Cf)]/1.4} × 稀释因子
    a. C 是指染料-蛋白共轭物浓度；
    b. 稀释因子是指在光度测量时的稀释倍数；
    c. A280 和 Amax 分别是指在 280 nm 处的吸光度以及在染料吸收波长处的吸光度；
    d. Cf 是校正因子；

9. 将标记蛋白储存在2-8℃、避光环境中。如果纯化蛋白偶联物的最终浓度小于1 mg/mL，则加入适量BSA或其他稳定蛋白。在2 mM叠氮化钠的存在下，共轭物应在2-8℃下稳定几个月。为了更长的存储，将共轭物分成小等分在≤-20℃冷冻保存。期间避免反复冻融，避光保存。

备注：我们可以根据客户的实验需求提供不同的纯化方式和材料，需要客户提前告知。

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